Διεκδικεί και αυτό με αξιώσεις τον τίτλο ενός από τα πιο όμορφα και χαρακτηριστικά μοναστήρια της Ελλάδας, κάτι που γίνεται προφανές σε όποιον βρεθεί εκεί χάρη στη μοναδική του θέσn και την εκπληκτική αιγαιοπελαγίτικη αισθητική. Βρίσκεται κάτω από το ενετικό κάστρο της Χώρας της Αστυπάλαιας και χρονολογείται από το 1762.
Η παράδοση αναφέρει ότι η ανοικοδόμηση της εκκλησίας πραγματοποιήθηκε από τον Όσιο Άνθιμο, έναν Αγιορείτη μοναχό με καταγωγή από το νησί της Κεφαλονιάς ο οποίος διακόσμησε την εκκλησία με πιστό αντίγραφο της εικόνας της Παναγίας Πορταϊτισσας από τον Ιερά Μονή Ιβήρων του Αγίου Ορους. Το εσωτερικό του ναού διαθέτει ένα ξυλόγλυπτο επιχρυσωμένο τέμπλο και οι τοιχογραφίες έχουν έντονες επιρροές από τη ρωσική σχολή τέχνης. H εκκλησία γιορτάζει στις 15 Αυγούστου με ένα θρυλικό πανηγύρι όπου συμμετέχει όλο το νησί.
